细菌CRISPR编辑株构建

服务说明

背景介绍

细菌是自然界中数量最多的一类生物，对细菌基因组进行改造，有助于我们理解病原菌的致病机理，耐药机制，清除耐药菌；改良工业菌株发酵，合成新的次级代谢产物，丰富生物原料等。

诺一生物拥有多年细菌突变体库构建，同源重组及CRISPR基因改造经验，针对每种细菌的不同特性，开发构建CRISPR/Cas9编辑体系，对于已经验证的细菌编辑体系，承诺不成功不收费。

CRISPR/Cas9编辑体系完善的菌株列表

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案例展示

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项目流程

1）项目评估及建立CRISPR/Cas9编辑方案

2）培养客户提供的菌株，并进行16s测序验证种属

3）进行药物敏感性筛选，确定筛选标记基因

4）利用E-CRISPR在线软件或本地CRISPR offinder-1.2软件设计gRNA

5）设计同源臂用于修复

6）将抗性标记基因，gRNA及同源臂构建至CRISPR/Cas9质粒系统

7）制备目标菌株感受态

8）电击转化

9）筛选及编辑菌株测序鉴定

客户须知

需客户提供菌种名称及培养条件，全基因组测序结果，目标基因

我方交付材料

1）用于编辑的质粒图谱

2）编辑后的菌株

3）实验报告（实验步骤，测序文件，相关图片等）

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